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　　扶正化瘀抗纤方对肝纤维化大鼠TGF-β1及PDGF表达的影响研究.pdf

　　目的本课题采用四氯化碳法建立肝纤维化大鼠模型，通过扶正化瘀抗纤方对造模大鼠进行干预，光镜下观察模型大鼠肝脏病理组织结构的变化，并用WESTERNBLOT、RTPCR检测肝脏组织中TGFΒ1及PDGF的表达，以探讨扶正化瘀抗纤方防治肝纤维化的可能作用机制。方法SPF级WISTAR大鼠70只，雄性，体重200±20G，随机分为空白组、模型组、熊去氧胆酸组及扶正化瘀抗纤方高、中、低剂量组，空白组10只大鼠，其余组各12只大鼠。采用复合因素制作大鼠肝纤维化模型，每组除空白组采用正常饲料及饮水外，其余各组采用正常饲料，以10％食用酒精为唯一饮料，腹腔注射40CCL4橄榄油剂（第1次用5ML/KG，以后每隔3D注射3ML/KG），2次/周，连续6周。从实验第一天开始，熊去氧胆酸组给药054G/KG灌胃；扶正化瘀抗纤方组予以药液高剂量189G/KG、中剂量945G/KG、低剂量47G/KG灌胃；空白组和模型组给予等量生理盐水054G/KG灌胃；干预治疗6周后取材。观察大鼠肝脏大体形态学及组织病理学改变，WESTERNBLOT检测肝组织TGFΒ1及PDGF蛋白表达，RTPCR检测肝组织中TGFΒ1MRNA及PDGFMRNA的表达。结果①大鼠肝纤维化模型的建立造模干预6周后，与空白组相比，模型组大鼠肝脏色暗红，肉眼可见黄色片状斑块，质地较硬，边缘钝；治疗各组大鼠肝脏肉眼可见不同程度的黄色斑点，边缘较钝，但优于模型组。肉眼观察各治疗组肝脏变化，以中药高剂量组肝纤维化程度最轻，西药组次之，中药中剂量组纤维化程度重于西药组，中药低剂量组纤维化程度最重；光镜下观察HE染色切片，模型组可见有肝细胞肿胀、变性坏死以及广泛的纤维增生；治疗组大鼠肝组织炎性病理变化均有不同程度的减轻，纤维组织增生减少。提示模型组与各治疗组均造模成功，中药组与西药组均可对肝纤维化的发生发展起到不同程度的治疗作用。②将干预前的大鼠体重与6周干预后的大鼠体重进行对比，空白组大鼠体重自然增长，与空白组相比，模型组大鼠体重增长最为缓慢（P005）。③肝纤维化大鼠肝组织TGFΒ1、PDGF在WESTERNBLOT检测中的表达空白组中TGFΒ1、PDGF均有少量的蛋白表达，与空白组相比，模型组大鼠肝组织中TGFΒ1、PDGF表达量明显上升（P005）；PDGF在中药高、中剂量组中的表达优于西药组（P④RTPCR检测肝组织中TGFΒ1MRNA及PDGFMRNA的表达与空白组相比，模型组大鼠肝组织中TGFΒ1、PDGF的表达较正常组织明显上升（P005），西药组的表达优于中药低剂量组（P005）；中药低剂量组中的表达虽有降低（P结论①大鼠经四氯化碳复合法干预6周可诱导比较典型的肝纤维化模型；②扶正化瘀抗纤方高剂量组可显著降低肝纤维化大鼠肝组织中TGFΒ1、PDGF的表达，减轻大鼠肝损伤及纤维化程度，其机制可能与抑制致纤细胞因子TGFΒ1、PDGF的表达有关。

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